核酸检测是疫情当下的高频词汇，但是您对核酸检测究竟知道多少呢？核酸检测是如何检测的？检测方法是什么？小编带你深度了解你的咽拭子发生了什么？让你清清楚楚了解核酸检测的小秘密！

　　实时荧光定量PCR技术

　　实时荧光定量PCR技术是此次核酸检测的主要技术依据，下面小编就带你首先了解这一明星级生物技术。

　　聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对。同理，痕量的病毒感染，其核酸也可以被捕捉到。该技术由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。

　　实时荧光定量PCR技术的原理及原理图：

　　实时荧光定量PCR技术是PCR技术的拓展，所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。PCR扩增时加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

　　图1. 实时荧光定量PCR原理图

　　逆转录PCR（reverse transcription PCR）或者称反转录PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。由一条RNA单链转录为互补DNA（cDNA）称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。

　　图2. 目标病毒RNA的逆转录PCR技术

　　那么你被采集的咽拭子是如何转变成PCR待测物的呢？首先要经过核酸提取，目前有成熟的核酸提取试剂盒来完成这一任务。新冠病毒的核酸是RNA，因此提取的核酸为RNA，然后经过逆转录，再经过实时荧光定量PCR就可以得到核酸检测结果了。

　　图3. 采样后处理示意图

　　概括来说，新冠病毒的核酸检测是利用逆转录实时荧光定量PCR技术实现阴阳性判断的。首先病毒的核酸RNA被提取出来，经过逆转录生成cDNA，再通过实时荧光定量PCR技术进行扩增和定性结果判定。通俗来讲，身体里非常少的病毒，需要先让它在实验室里不断变多，然后通过仪器检测多的核酸信号。如果您的体内没有病毒，没有被病毒感染，那么您的样品核酸不能变多，仪器就检测不到。您明白了吗？如果您想知道这其中更加专业的分子机理，建议您阅读分子生物学实验技术的相关书籍，里面有您想知道的答案！