【 PCR-测序法检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性研究】

　　结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病，仍然是世界性公共卫生领域的重大威胁。然而，近些年来氧氟沙星耐药结核分枝杆菌的不断出现和传播，使得对耐多药/利福平耐药结核病的治疗更加棘手。比例法获得结核分枝杆菌的耐药表型约需8周。因此，临床上应采用分子生物学方法检测结核分枝杆菌的氧氟沙星耐药性。目前，线性探针技术不能检测近年来在结核分枝杆菌中出现的新的对氟喹诺酮药物耐药密切相关的位点突变。为此，有必要尝试应用PCR-测序法检测临床BACTEC MGIT 960培养物中结核分枝杆菌氧氟沙星的耐药性。该项目首先对收集的50株非重复单耐氧氟沙星结核分枝杆菌进行耐药基因gyrA和gyrB突变研究。随后探讨了应用PCR-测序法检测临床BACTEC MIGIT 960培养物中结核分枝杆菌的氧氟沙星耐药性。研究发现，(1)66%的单耐氧氟沙星结核分枝杆菌中存在单位点突变，其中在gyrB基因中的T539A和E540D为在国内首次报道；(2)氧氟沙星耐药性的敏感性和特异性分别为78.6%和99.5%，敏感性低于线性探针法(94.8%)，特异性高于线性探针法(98%)。但线性探针法仅能检测结核分枝杆菌gyrA和gyrB基因中出现频率较高的QRDR突变，而PCR-测序法可检测gyrA和gyrB基因QRDR中所有发生的突变，进而可以快速推导结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性。

　　【 miR-29c阻抑小鼠矽肺纤维化的机制研究】

　　近年来矽肺病的流行呈现出群发性、低龄化、死亡率高等新特点，使其成为全社会关注的重大公共卫生问题。因此，研究矽肺纤维化发生发展的分子机制，探寻矽肺纤维化新的治疗靶点以延缓或阻断纤维化的进程，具有重要的现实意义。该研究通过在在小鼠矽肺动物模型体内给予小鼠miR-29c过表达的慢病毒载体，发现其能够上调肺组织中的miR-29c的表达，并能够抑制肺组织中β-catenin、MMP2和MMP9这些Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达；同时应用ELISA技术，证明Lv-miR-29c具有抑制小鼠肺泡灌洗液中TGF-β1和IL-6分泌的作用；通过测定肺组织中羟脯氨酸含量和病理观察，显示小鼠miR-29c过表达的慢病毒载体可抑制肺组织中羟脯氨酸的表达，并能够减轻肺组织纤维化程度，具有阻抑肺纤维化发生发展的作用。该研究有助于阐明miR-29c在矽肺发病机制中的作用，为矽肺纤维化的治疗靶标提供新的理论依据，同时为矽肺纤维化的临床治疗开辟新的思路。

　　【太阳黑子、宇宙射线和地磁场活动对新发病毒性传染病发生的影响】

　　新发病毒性传染病的预测预警是当前世界范围内广泛关注的热点和难点问题。由于新发病毒性传染病的发生具有传染性强、传播速度广、病死率高、难以防范等特点，极容易发展成突发公共卫生事件或国际关注事件，因此，世界卫生组织和各国政府都高度重视新发病毒性传染病的预防。近些年来，新发病毒性传染病不断在世界范围内出现暴发流行，给人类健康、全球政治和经济发展带来严重影响，然而医学界一直没找到其暴发流行的真正原因。该课题组成员在充分了解国内外相关研究领域发展现状与动态的基础上，打破了目前医学界在新发病毒性传染病暴发问题上的传统认识，提出了太阳黑子、宇宙射线和地磁场活动可能对新发病毒性传染病暴发有重要影响的科学新观点。该研究首次发现：(1)流感大流行不仅发生在太阳黑子活动的峰值年，也发生在太阳黑子活动的谷值年，而且从统计学、流行病学、实验室证据三个角度充分证明太阳黑子极值年或前、后一年确实是影响流感大流行的一个重要危险因素，并从太阳黑子活动影响气候变化、候鸟迁徙、动物种群混合以及射线导致病毒基因变异和重组的角度科学的阐述了太阳黑子活动为什么会导致流感大流行的发生。(2)太阳黑子极值年或前、后一年也是影响新发病毒传染病的重要危险因素，并为新发病毒性传染病的预测预警提供了科学依据。(3)巴西地区急剧减弱的地磁场、突然增强的宇宙射线可能是导致寨卡病毒大流行的重要原因，并科学的解释了其中的原理。(4)提出了通过监测地磁场、太阳黑子和宇宙射线三个因素来预警未来新发病毒传染病的科学方法。

　　【转基因大豆DAS-44406-6、DAS-81419-2的亚慢性毒性研究】

　　国内首次综合利用营养成分分析、抗营养因子分析、亚慢性毒性试验、过敏性生物信息学分析等技术对转入2mepsps、aad-12、pat三个外源性基因的新型转基因抗除草剂大豆DAS-44406-6和转入cry1Ac、cry1F两个外源性基因的新型转基因抗虫大豆DAS-81419-2进行了系统的食用安全性研究。营养成分分析，DAS-44406-6和DAS-81419-2与亲本对照比较，水分、灰分、蛋白质、脂肪、淀粉、粗纤维、钙、磷等营养成分差异极小，且无生理学意义。抗营养因子分析，DAS-44406-6和DAS-81419-2与亲本对照比较，植酸含量、胰蛋白酶抑制剂活性差异极小，且无生理学意义。亚慢性毒性试验，DAS-44406-6和DAS-81419-2的90天喂养试验研究结果显示，转基因大豆组与同等剂量的非转基因组相比，大鼠的体重增量、食物利用率、总进食量、脏体比、血清生化、血常规等指标差异均在正常范围内，组织病理学检查差异无生理学意义。过敏性生物信息学分析，未发现外源蛋白2mEPSPS、AAD-12、PAT、Cry1F和Cry1Ac的80个氨基酸序列与已知过敏原有超过35%的序列同源性。未发现外源蛋白2mEPSPS、AAD-12、PAT、Cry1F和Cry1Ac与已知过敏源有8个连续相同的氨基酸序列。因此，外源蛋白2mEPSPS、AAD-12、PAT、Cry1F和Cry1Ac与已知过敏原不存在较高的序列同源性，其潜在过敏性的可能性较低。

　　【天津市大气可吸入颗粒物与寿命损失年关系的研究】

　　大气污染影响人群范围最大，探讨大气污染与人群健康的关系已成为公共卫生领域的热点和难点问题之一。大气颗粒物已被国内外大量研究证实可对人群健康产生较大的危害。研究中仅以死亡率或死亡数量作为大气颗粒物对人群健康影响的效应指标，可能造成大气颗粒物对人群健康影响暴露-反应关系的偏倚或低估，从而不能全面准确地评估大气颗粒物对人群健康的影响。寿命损失年作为疾病负担的指标之一，已被证实可综合考虑疾病造成的早死对人群健康的危害，但国内外以此指标作为健康结局的研究相对较少。本研究以大气可吸入颗粒物作为指示污染物，以寿命损失年作为健康效应指标，运用广义相加模型，探讨天津市大气可吸入颗粒物与寿命损失年的关系。首次系统全面地划分四种病因别(总死亡、循环系统疾病、脑血管疾病和缺血性心脏病)和六个城区，探讨了天津市大气可吸入颗粒物与人群寿命损失年的定量关系。填补了天津市大气可吸入颗粒物对不同城区和不同病因别人群寿命损失年影响定量关系的空白，同时可为天津市防治颗粒物污染，针对性保障人群健康提供了新的流行病学证据，具有一定的公共卫生实践意义。

　　【多用途空气微生物采样平台装置】

　　在公共场所和医药工业洁净室(区)日常检测工作中经常要采集浮游菌和沉降菌。由于公共场所种类多样，各类场所采样环境差异较大，微生物采样工作将难以规范的完成，严重影响微生物采样结果的准确性。同时以常规微生物采样装置通常需要每种微生物依次进行采样，完成采样要求所需的采样时间极长，严重影响采样数量及日常工作任务的完成，医药工业洁净室(区)空气浮游菌和沉降菌检测也存在着类似问题。该实用新型专利从空气微生物采样的准确性和节约采样时间角度入手，设计了(1)活动处理平台，实现了处理平台的部分折叠或收缩，减少了采样车非工作状态时的体积；(2)伸缩杆，使采样高度可以在1.3-4.4m范围内自由变换，实现了采样高度的可调节，增强了采样平台装置应用于各类场所的适应性；(3)整合采样托盘，使多台采样器可以同时采样，实现了采样时间的节约，提高了工作效率；(4)连接件，使伸缩杆与托盘通过连接件的套管相连，通过活动把手使托盘绕中心轴旋转，进而实现了托盘角度的调整。该实用新型专利自2016年至2018年间，先后应用于100个项目的检测实践工作中，其中包括：天津市地铁6号线全线候车室集中浮游菌和沉降菌检测；中华人民共和国第十三届全运会比赛场馆和接待酒店中浮游菌检测；天津市地铁5号线全线候车室中浮游菌和沉降菌检测；天津市地铁1号线东延线全线候车室中浮游菌和沉降菌检测等。该实用新型专利已入选天津市科学技术局、天津市产业共生技术创新战略联盟、天津市水环境产业技术创新联盟、中国盐碱地生态产业技术创新战略联盟和天津市大气污染防治产业技术创新联盟联合发布的《天津市节能低碳与环境污染防治技术指导目录(第三辑)》。